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O maracujá-amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa) é uma das principais frutíferas cultivadas no Brasil, o fator limitante para a cultura é o manejo pós colheita, nesse sentido se destaca a antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antifúngica de diferentes concentrações do óleo essencial de limão thaiti, no controle in vitro do Colletotrichum gloeosporioides, isolados de frutos sintomático de maracujá. Os tratamentos utilizados foram 0,25; 0,5; 0,75 e 1,0%, tendo como testemunha o uso de água. O trabalho foi conduzido no laboratório de Microbiologia da Faculdade de Ciências Sociais e Agrárias de Itapeva – FAIT no município de Itapeva–SP. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado (DIC), com cinco tratamentos e quatro repetições. Cada repetição correspondeu a uma placa de Petri devidamente autoclavadas, totalizando vinte e cinco placas. O fungo C. gloeosporioides foi isolado diretamente de frutos de maracujá com sintomas da doença e sinais do patógeno, sendo cultivado em meio BDA (batata-dextrose-ágar) por quinze (15) dias a 25ºC e sob luz fluorescente. O óleo foi adicionado ao meio de cultura batata dextrose ágar (BDA) no momento deste ser vertido em placas de Petri. Após a solidificação do meio, foi transferido para o centro de cada uma das placas, um disco de 0,5 cm de diâmetro colonizado pelo patógeno. As placas foram mantidas em BOD a 25 °C. Avaliou-se o índice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), as dezenove (19), vinte e sete (27) e quarenta e oito (48) horas após instalação do teste, momento esse em que a testemunha alcançou a borda da placa, representando, assim, o crescimento máximo. A medição se deu através de duas posições perpendiculares entre si, e considerando-se o valor médio destas. Para o cálculo do índice de velocidade de crescimento micelial, utilizou-se a fórmula IVCM = Σ (D-Da) / N, Sendo: IVCM= índice de velocidade de crescimento micelial; D= diâmetro médio atual da colônia; Da= diâmetro médio da colônia do dia anterior; N= número de dias após a inoculação. Pode-se concluir que o uso do óleo essencial de limão thaiti apresentou potencial no controle in vitro do Colletotrichum gloeosporioides, porém a eficiência cresce de acordo com a concentração empregada.